Invriezen

cryopreservatie3Invriezen is een lange weg van +37 graden naar - 196 graden Celsius. Het risico bij invriezen is de ijskristalvorming van water in de cellen tijdens de afkoeling onder 0 graden. De kristalvorming wordt zoveel mogelijk vermeden door het water te ontrekken uit de cellen van de embryo's voordat ijskristal vorming gaat optreden. Nadat de 0 graden wordt overschreden wordt de temperatuur langzaam stapsgewijs met 0.5 - 1 graad per minuut omlaag gebracht. Het metabolisme wordt door de afkoeling langzaam stil gelegd. Nadat de temperatuur onder de - 40 graden is worden de afkoelingsstappen groter. Voor de afkoeling wordt vaak gebruik gemaakt van vloeibare stikstof (-196 graden). Andere vloeistoffen (alcohol) worden eveneens gebruikt zolang de vloeistof onder 0 graden maar niet overgaat in vaste vorm. Het voordeel van stikstof is dat het vanuit een voorraad tank via een kleppen systeem gedoseerd in de invrieskamer met embryo's gespoten cryopreservatie1kan worden. Een computer programma leest de temperatuur en regelt de stikstof dosering. De embryo's komen niet in contact met de stikstof. De embryo's zitten in afgesloten rietjes. Nadat de temperatuur van -196 graden is bereikt worden de rietjes met embryo's, zaadcellen of eicellen overgebracht in bewaarvaten gevuld met vloeibare stikstof. De met naam gecodeerde rietjes/ampullen worden eveneens opgeborgen in het stikstofvat volgens een kleurcoderingsysteem dat de exacte plaats en identificatie aangeeft in het vat.

Embryo's, zaadcellen en eicellen kunnen technisch gezien jaren ingevroren blijven.

 

Ontdooien

Ontdooien is de weg terug van -196 graden naar +37 graden. De cellen moeten weer stapje voor stapje water opnemen. Het komt regelmatig voor dat een aantal cellen het invries/ontdooi proces niet overleven. Op zich hoeft dat geen probleem te zijn voor embryo's omdat er nog steeds levende cellen overblijven die weer kunnen gaan delen. Alle cellen in een 2 tot 16 cellig stadium zijn namelijk nog identiek, celverlies leidt niet tot informatie verlies. Voor eicellen (1 cel) is geldt dit niet, als deze het niet overleeft houdt het daarmee op. Zaadcellen incubatorzijn vaak in zulke grote aantallen dat er nog genoeg overblijven. De concentratie na ontdooiien bepaalt welke behandeling wenselijk is.

Nadat de eicel of het embryo ontdooid zijn moeten dezer eerst een korte periode in de incubator worden geplaatst. Daarna kan de eicel met de ICSI procedure bevrucht worden of het embryo worden teruggelaatst in de baarmoeder. De kans om zwanger te worden van ingevroren/ontdooide eicellen of embryo's ligt in het algemeen iets lager dan de kans met 'verse' eicellen/embryo's.

Inloggen